Диагностические сыворотки — это биологические реагенты, содержащие специфические антитела, предназначенные для выявления антигенов микроорганизмов в исследуемом биологическом материале. Они применяются в клинической, эпидемиологической и ветеринарной практике для серологической идентификации возбудителей инфекционных заболеваний. Точное определение этиологического агента позволяет врачу подтвердить диагноз, выбрать терапию и провести эпидемиологическое расследование.
Биологическая природа диагностических сывороток
Состав и принцип действия
Диагностическая сыворотка изготавливается путём иммунизации животных (чаще всего кроликов, овец, лошадей) антигенами бактерий или вирусов. После нескольких циклов введения антигенов у животных развивается гуморальный иммунный ответ, и в крови накапливаются специфические иммуноглобулины. Из полученной крови выделяется сыворотка, содержащая антитела к заданному патогену.
Антитела в составе реагента специфически взаимодействуют с антигенами микробной клетки — это позволяет проводить реакции агглютинации, преципитации, флуоресценции или иммуноферментного анализа.
Валентность и специфичность
Сыворотки бывают:
- Моновалентные — содержат антитела только к одному антигену;
- Поливалентные — содержат смесь антител к нескольким серологическим вариантам или видам микроорганизмов.
Специфичность сыворотки определяется методом её получения и степенью очистки от неспецифических белков. Высокоспецифичные реагенты позволяют дифференцировать близкородственные штаммы.
Применение в лабораторной диагностике
Серологическая идентификация
Наиболее распространённым методом применения является реакция агглютинации. При смешивании взвеси микроорганизмов с диагностической сывороткой в присутствии специфических антител происходит образование агглютинатов — видимых хлопьев. Такая реакция позволяет определить вид, серогруппу и серотип бактерий.
На практике диагностические сыворотки применяются для идентификации:
- кишечной группы бактерий (Escherichia coli, Salmonella, Shigella);
- возбудителей кишечных и зоонозных инфекций (Yersinia, Brucella);
- возбудителей кокковых инфекций (Streptococcus, Neisseria, Staphylococcus);
- менингококков, холерных вибрионов, сальмонелл различных сероваров.
Подтверждение диагноза
Использование сывороток в серологической диагностике позволяет:
- подтвердить диагноз при подозрении на острую инфекцию;
- определить наличие антигенов в клиническом материале (кал, кровь, ликвор);
- выделить возбудителя из посевов и идентифицировать его без молекулярных методов;
- провести ретроспективную диагностику при наличии иммунного ответа у пациента.
Применение реагентов актуально в микробиологических лабораториях медицинских учреждений, санитарно-эпидемиологических центрах, ветеринарных лабораториях.
Требования к качеству и условиям применения
Стандартизация
Диагностические сыворотки должны соответствовать требованиям нормативной документации (ГОСТ, ТУ) и проходить контроль по следующим показателям:
- титр (определяется минимальным разведением, при котором сохраняется видимая реакция);
- специфичность (отсутствие перекрёстной реакции с другими микроорганизмами);
- стерильность (отсутствие бактериальной и грибковой контаминации);
- отсутствие токсичности (при использовании in vitro).
Каждая партия сопровождается паспортом качества, где указаны условия хранения, срок годности, методика применения, объём, способ разведения и ограничения.
Хранение и транспортировка
Сыворотки хранятся при температуре от +2 °C до +8 °C, защищены от света. Замораживание не допускается. Срок годности — от 6 до 18 месяцев в зависимости от состава и формы выпуска (жидкая, лиофилизированная).
Транспортировка осуществляется с соблюдением холодовой цепи. Нарушение условий хранения может привести к денатурации белков и снижению активности антител.
Преимущества использования в лабораторной практике
- Быстрота: большинство реакций проводится в течение 1–3 минут;
- Экономичность: одна ампула или флакон рассчитан на множество определений;
- Независимость от сложного оборудования: не требуется ПЦР-оборудование или автоматические анализаторы;
- Универсальность: подходят для клинического, эпидемиологического и ветеринарного применения;
- Возможность типирования: определение серогруппы важно для эпидемиологического надзора.
Для лабораторий, работающих с бактериальными и вирусными инфекциями, необходимо регулярно пополнять и актуализировать набор диагностических сывороток. При необходимости быстрой закупки можно купить диагностические сыворотки с доставкой, выбрав из доступного ассортимента зарегистрированных реагентов с паспортами качества и методическими рекомендациями.